《生物化学》实验教学大纲(医学专业)
课程代码：25205
课程负责人：喻 红
课程中文名称：生物化学
课程英文名称： Biochemistry
课程类别：必修
课程学分数：1.5 学分
课程学时数：实验时数54
面向专业：临床医学、检验、预防五年制、临床医学及口腔医学七年制、临床医学及口腔医学八年制
本课程的前导课程：医学基础化学、医学有机化学、细胞生物学
一、实验教学目的和基本要求
生物化学是一门实验科学,它运用化学的方法和手段来研究生物有机体的物质组成及变化。随着现代科学技术的发展，各种先进的手段愈来愈被广泛地应用于生物化学研究中。生物化学实验教学是医学人才培养的重要基础课程，是医学生实验技能与素质培养不可缺少的一个重要环节。生物化学实验是生物化学教学中不可缺少的实践环节，本实验教学的主要目的是给予学生生物化学实验的基本方法与技术的初步训练，使学生巩固和加强课堂所学的基础理论知识，掌握生物化学技术的基本理论与操作，同时了解生物化学技术在医学研究领域的应用，更重要的是在实验中培养学生的科学分析问题和解决问题的能力，养成严肃认真、实事求是的科学态度，培养学生的创新精神和创新能力。由于生物化学的新技术新方法层出不穷，本课程将根据学科的发展，介绍新的知识与技术。
教学的基本要求：
生物化学实验教学以学生在实验室实践为主,发挥学生的主体作用，教师只作必要的实验原理和注意事项的讲解，并注意引导学生拓展所学的内容，通过实验内容的学习了解生物化学技术的原理和操作要点，并注意培养学生的实践能力和创新能力。
1．熟悉和掌握一般生物化学实验中最常用的分离分析方法以及相应仪器的使用, 了解、掌握各种实验技能、技术、手段和方法，使学生受到生物化学实验技能训练。
2．培养学生分析问题解决问题的能力以及独立思考和独立工作的能力，学会联系理论知识进行独立设计和实验，仔细观察和分析实验现象，正确处理数据及解释现象，从中得出科学的结论。
3. 培养严谨科学的工作态度和作风，培养创新能力，为学习其他课程和今后从事医学领域的科研打下坚实的基础。
二、主要仪器设备
电冰箱 气浴恒温振荡器 721分光光度计 紫外可见分光光度计 电热三用水箱 电子天平 紫外透射反射分析仪 微量加样器（10ul， 100ul, 500ul,1000ul） 台式高速离心机 PCR仪 电泳仪 水平电泳槽 垂直电泳槽 压力蒸气灭菌器 隔水式恒温培养箱 微波炉 磁力搅拌器 电动搅拌机 电磁炉 恒温水浴锅 电热鼓风干燥箱 部分收集器 蠕动泵 多功能酶标仪
三、实验课程内容与学时分配
实验课程内容与学时分配表
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序号 |
实验项目 名称 |
实验要求 |
学时 |
实验属性 |
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1
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吸光光度法的概述 蛋白质含量的测定 |
掌握实验室规则和常用生物化学仪器名称，熟悉各种常用生物化学仪器的正确操作及一般维护。掌握吸光光度法的原理。掌握分光光度法测物质吸收光谱的方法，绘制吸收光谱曲线。 了解蛋白质含量测定的方法。掌握Lowry法蛋白质定量的基本原理及方法。掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量。 |
5 |
基础性 |
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2 |
电泳技术； 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 |
掌握电泳法的基本原理及其主要影响因素。 掌握醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白的方法 |
4 |
基础性 |
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3 |
层析法 凝胶层析分离血红蛋白与鱼精蛋白 离子交换层析分离混合氨基酸 |
熟悉层析法分类与基本原理。 掌握凝胶层析分离蛋白质的基本原理及应用。 熟悉掌握离子交换层析分离混合氨基酸的基本原理及应用。 |
5 |
基础性 |
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4 |
外周血白细胞DNA的提取(NaI法) DNA紫外定量分析及DNA琼脂糖凝胶电泳 |
了解核酸分离纯化的基本原理和方法。掌握NaI法提取外周血白细胞DNA的基本原理与方法。 掌握DNA的分析鉴定方法及DNA琼脂糖凝胶电泳的原理及操作。 |
6
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综合性
|
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5 |
血清LDH分析： 琼脂糖凝胶电泳分析血清LDH同工酶酶谱 血清乳酸脱氢酶活性的测定 |
比较吸光光度法及电泳在酶学分析的应用。掌握同工酶的基本知识与分析方法。掌握琼脂糖凝胶电泳分离蛋白质的基本原理及用途，LDH同工酶的显色机理。掌握血清LDH活性测定的原理、方法与意义 |
5 |
综合性
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6 |
底物浓度对酶活性的影响-碱性磷酸酶Km值的测定 |
掌握有关酶促反应动力学基本知识。 掌握利用双倒数法测定酶Km值的原理及酶Km值测定的实验方法。 |
4 |
综合性
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7 |
GST酶的亲和层析；SDS-PAGE鉴定酶的纯度 |
熟悉亲和层析法的基本原理。 进一步掌握电泳法的用途， PAGE分离蛋白质的基本原理及分离蛋白质的特点 |
7 |
综合性
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8 |
酶在医学上的应用： 酶法测定血液葡萄糖含量 酶法测定血清胆固醇含量 血清谷-丙转氨酶(ALT)活性的测定(改良Mohun法) |
掌握酶法定量分析方法。终点测定法在临床生化检验中的应用。血糖、血液胆固醇等指标的临床意义。酶标仪的应用。 掌握酶活性测定的方法。了解ALT活性测定的方法及其基本原理。掌握改良Mohun法的基本原理及测定ALT活性的操作方法。 |
6 |
综合性
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9 |
实验总结 |
以蛋白质、核酸分析为主线，巩固和加深学生对生化三大基本实验技术的认识与掌握，培养学生独立设计和解决问题的能力 |
3 |
设计性 |
四、教材与参考书
教材：《医学生物化学实验技术》（第一版），武汉大学出版社，汪炳华主编，2002年出版
参考书：
[1]《蛋白质电泳实验技术》（第二版），科学出版社，郭尧君主编，2005年出版
[2]《生物分子科学实验技术》（第一版）湖南科学技术出版社Rob Reeb et al著，王小菁、李德红、孟祥春等译2001年出版
[3] 《生物化学实验》（第一版）化学工业出版社， 董晓燕主编，2003年出版
[4] 《分子生物学与蛋白质化学实验方法》（第一版）化工出版社，斯潘格勒著。2006年出版
[5] 《蛋白质技术手册》（第二版）科学出版社，汪家政，范明主编，2001年出版
五、考核方式
实验评分办法：计30分 (实验报告10%，平时考查20％， 期末考试70%）
平时考查：占实验成绩的20%。包括实验出勤率，实验技能、实验关键试剂的作用等知识考核。
《生物化学》实验教学大纲(护理专业)
课程代码：25205
课程负责人：喻 红
课程中文名称：生物化学
课程英文名称： Biochemistry
课程类别：必修
课程学分数：0.5 学分
课程学时数：实验时数18
面向专业：护理五年制
本课程的前导课程：医学基础化学、医学有机化学、细胞生物学
一、实验教学目的和基本要求
生物化学是一门实验科学,它运用化学的方法和手段来研究生物有机体的物质组成及变化。随着现代科学技术的发展，各种先进的手段愈来愈被广泛地应用于生物化学研究中。生物化学实验教学是医学人才培养的重要基础课程，是医学生实验技能与素质培养不可缺少的一个重要环节。生物化学实验是生物化学教学中不可缺少的实践环节，本实验教学的主要目的是给予学生生物化学实验的基本方法与技术的初步训练，使学生巩固和加强课堂所学的基础理论知识，掌握生物化学技术的基本理论与操作，同时了解生物化学技术在医学研究领域的应用，更重要的是在实验中培养学生的科学分析问题和解决问题的能力，养成严肃认真、实事求是的科学态度，培养学生的创新精神和创新能力。由于生物化学的新技术新方法层出不穷，本课程将根据学科的发展，介绍新的知识与技术。
教学的基本要求：
生物化学实验教学以学生在实验室实践为主,发挥学生的主体作用，教师只作必要的实验原理和注意事项的讲解，并注意引导学生拓展所学的内容，通过实验内容的学习了解生物化学技术的原理和操作要点，并注意培养学生的实践能力和创新能力。
1．熟悉和掌握一般生物化学实验中最常用的分离分析方法以及相应仪器的使用, 了解、掌握各种实验技能、技术、手段和方法，使学生受到生物化学实验技能训练。
2．培养学生分析问题解决问题的能力以及独立思考和独立工作的能力，学会联系理论知识进行独立设计和实验，仔细观察和分析实验现象，正确处理数据及解释现象，从中得出科学的结论。
3. 培养严谨科学的工作态度和作风，培养创新能力，为学习其他课程和今后从事医学领域的科研打下坚实的基础。
二、主要仪器设备
电冰箱 气浴恒温振荡器 721分光光度计 紫外可见分光光度计 电热三用水箱 电子天平 紫外透射反射分析仪 微量加样器（10ul， 100ul, 500ul,1000ul） 台式高速离心机 PCR仪 电泳仪 水平电泳槽 垂直电泳槽 压力蒸气灭菌器 隔水式恒温培养箱 微波炉 磁力搅拌器 电动搅拌机 电磁炉 恒温水浴锅 电热鼓风干燥箱 部分收集器 蠕动泵 多功能酶标仪
三、实验课程内容与学时分配
实验课程内容与学时分配表
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序号 |
实验项目 名称 |
实验要求 |
学时 |
实验属性 |
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1
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吸光光度法的概述 蛋白质含量的测定 |
掌握实验室规则和常用生物化学仪器名称，熟悉各种常用生物化学仪器的正确操作及一般维护。掌握吸光光度法的原理。掌握分光光度法测物质吸收光谱的方法，绘制吸收光谱曲线。 了解蛋白质含量测定的方法。掌握Lowry法蛋白质定量的基本原理及方法。掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量。 |
5 |
基础性 |
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2 |
电泳技术； 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 |
掌握电泳法的基本原理及其主要影响因素。 掌握醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白的方法 |
4 |
基础性 |
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3 |
层析法 凝胶层析分离血红蛋白与鱼精蛋白 离子交换层析分离混合氨基酸 |
熟悉层析法分类与基本原理。 掌握凝胶层析分离蛋白质的基本原理及应用。 熟悉掌握离子交换层析分离混合氨基酸的基本原理及应用。 |
4 |
基础性 |
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4 |
血清LDH分析： 血清乳酸脱氢酶活性的测定 |
比较吸光光度法及电泳在酶学分析的应用。掌握同工酶的基本知识与分析方法。掌握血清LDH活性测定的原理、方法与意义 |
5 |
综合性
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四、教材与参考书
教材：《医学生物化学实验技术》（第一版），武汉大学出版社，汪炳华主编，2002年出版
参考书：
[1]《蛋白质电泳实验技术》（第二版），科学出版社，郭尧君主编，2005年出版
[2]《生物分子科学实验技术》（第一版）湖南科学技术出版社Rob Reeb et al著，王小菁、李德红、孟祥春等译2001年出版
[3] 《生物化学实验》（第一版）化学工业出版社， 董晓燕主编，2003年出版
[4] 《分子生物学与蛋白质化学实验方法》（第一版）化工出版社，斯潘格勒著。2006年出版
[5] 《蛋白质技术手册》（第二版）科学出版社，汪家政，范明主编，2001年出版
五、考核方式
实验评分办法：计30分 (实验报告10%，平时考查20％， 期末考试70%）
平时考查：占实验成绩的20%。包括实验出勤率，实验技能、实验关键试剂的作用等知识考核。