《医学生物化学实验》-预防医学、口腔医学
《医学生物化学实验》-预防医学、口腔医学

课程代码:1000058                             开课学院:基础医学院

开课学期:第34)学期                        授课对象:临床医学五年制、预防、口腔医学五七八

    分:1学分                               课程负责人:喻红

课程简介:

 

序号

实验项目

名称、内容

实验要求

学时

实验属性

每组人数

已开/未开

1

吸光光度法的概述;吸收光谱曲线的绘制

紫外分光光度法及Lowry法对蛋白质含量的测定

掌握实验室规则和常用生物化学仪器名称,熟悉各种常用生物化学仪器的正确操作及一般维护。掌握吸光光度法的原理。掌握分光光度法测物质吸收光谱的方法,绘制吸收光谱曲线。了解蛋白质含量测定的方法。掌握Lowry法蛋白质定量的基本原理及方法。掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量。

5

 

基础

24

已开

2

电泳技术基本原理及其影响因素概述;

血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳

掌握电泳法的基本原理及其主要影响因素。掌握醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白的方法

4

基础

24

已开

3

层析法的分类与基本原理概述;

凝胶层析分离血红蛋白与鱼精蛋白

离子交换层析分离混合氨基酸

熟悉层析法分类与基本原理。掌握凝胶层析分离蛋白质的基本原理及应用。

熟悉离子交换层析基本原理及应用。掌握氨基酸的离子交换层析操作技术。

5

基础

24

已开

4

核酸分离纯化及鉴定分析

外周血白细胞DNA提取(NaI法)

DNA紫外分析及琼脂糖凝胶电泳鉴定

核酸分离纯化的基本原理和选择方法。以NaI法提取外周血白细胞DNA为例,掌握基本流程与方法,及DNA的定性定量及鉴定方法

6

综合实验

24

已开

5

酶学研究:

  • 血清乳酸脱氢酶(LDH)的综合分析:血清LDH活性及LDH同工酶酶谱分析(琼脂糖凝胶电泳法);
  • 底物浓度对酶活性的影响——碱性磷酸酶Km值的测定(双倒数法);
  • GST酶蛋白的亲和层析纯化及SDS-PAGE鉴定蛋白纯度及基本性质;
  • 酶法分析的临床意义:酶学终点测定法对血糖、胆固醇含量的测定;血清谷-丙转氨酶(ALT)活性测定法

涉及一系列的酶学分析方法,掌握酶活性测定、同工酶谱分析、酶促反应动力学研究、酶蛋白的高效分离纯化及鉴定、酶在医学上的应用;吸光光度法、电泳及层析在酶学分析的应用

 

 

 

5

4

7

6

综合分析、系统实验

24

已开

6

实验总结,设计性实验分析

以血液或工程菌中某一蛋白质的分离纯化及分析为主线,让学生设计实验方案,并总结讨论,以巩固和加深对生化基本实验技术的认识与掌握,培养学生独立设计和解决问题的能力

3

综合

24

已开

 

教学方法与手段:教师讲解为辅,学生动手操作为主

课程开设时间:45学时

课程考核:闭卷考试

评分办法:计100分  (实验报告15%,平时考查15%, 期末考试70%)

平时考查:占实验成绩的30%。包括实验出勤率,实验技能、实验总结,设计性实验分析。

    材:《医学生物化学实验技术》(第二版),湖北省科技出版社,2010年出版

  1. 参考书目:《蛋白质电泳实验技术》(第二版),科学出版社,郭尧君主编,2005年出版
  2. 《生物分子科学实验技术》(第一版)湖南科学技术出版社Rob Reeb et al著,王小菁、李德红、孟祥春等译2001年出版
  3. 《生物化学实验》(第一版)化学工业出版社, 董晓燕主编,2003年出版
  4. 《分子生物学与蛋白质化学实验方法》(第一版)化工出版社,斯潘格勒著。2006年出版
  5. 《蛋白质技术手册》(第二版)科学出版社,汪家政,范明主编,2001年出版
  6.  《基因组学与基因表达、蛋白质组学,蛋白质重组与蛋白质工程》(第一版)科学出版社David P Clark,Nanette J Paazdernik. 2009年出版
  7. 《蛋白质生物化学与蛋白质组学》(第一版)科学出版社Hubert Rehm主编,2007年出版
  8. 《分子克隆实验指南》(第三版)科学出版社J.萨姆布卢克等著,黄培堂译. 2002年出版.
  9. 《疾病蛋白质组学》(第一版)化工出版社.陈主初,肖志强主编,2006年出版